
固相酶联免疫吸附分析方法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)是一种基于抗原-抗体特异性结合原理的非均相酶免疫测定技术,由瑞典学者Engvall和荷兰学者Van Weemen于1971年分别独立建立。该方法通过将抗原或抗体固定于聚苯乙烯微孔板等固相载体表面,利用酶标记物催化底物显色实现微量物质的定量或定性检测,广泛应用于临床诊断、兽药残留检测及食品安全分析等领域 。
该技术的固相载体发展始于1967年发现蛋白质可吸附于塑料表面的现象,聚苯乙烯微孔板因价格低廉、适配自动化设备等优势成为主流载体 。为克服疏水特性导致的分子构象改变和包被容量限制,后续发展了物理吸附结合表面改性(如紫外线照射处理)和化学共价结合法(如羧甲基葡聚糖层接枝)等优化手段 。检测方法包含双抗体夹心法、竞争法等多种类型,操作流程涵盖抗体包被、样品孵育、洗涤及显色等标准化步骤 。
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